高效液相色谱仪的基本概念术语

发布时间：2019-04-04

1．色谱图和峰参数

色谱图：样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线。

基线：经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。

噪音：基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。

漂移：基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。

色谱峰：组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线不对称色谱峰有两种：前延峰和拖尾峰。前者少见。

拖尾因子：用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子或不对称因子。

峰底：基线上峰的起点至终点的距离。

峰高：峰的最高点至峰底的距离。

峰宽：峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。

半峰宽：峰高一半处的峰宽。

峰面积：峰与峰底所包围的面积。

2．定性参数（保留值）

死时间：不保留组分的保留时间。即流动相通过色谱柱的时间。

死体积：由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙、柱出口管路体积、检测器流动池体积。

保留时间：从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。

保留体积：从进样开始到某组分在柱后出现浓度极大值时流出溶剂的体积。又称洗脱体积。

3．柱效参数

理论塔板数：用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。取决于固定相的种类、性质（粒度、粒径分布等）、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。

理论塔板高度：每单位柱长的方差。实际应用时往往用柱长和理论塔板数计算。

4．相平衡参数

分配系数：在一定温度下，化合物在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的浓度之比。分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。

容量因子：化合物在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的量之比。因此容量因子也称质量分配系数。

容量因子的物理意义：表示一个组分在固定相中停留的时间是不保留组分保留时间的几倍。

容量因子与分配系数的不同点是：取决于组分、流动相、固定相的性质及温度，而与体积无关。

选择性因子：相邻两组分的分配系数或容量因子之比。

5．分离参数

分离度：相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。

提高分离度有三种途径：

①增加塔板数。方法之一是增加柱长，但这样会延长保留时间、增加柱压。更好的方法是降低塔板高度，提高柱效。

②增加选择性。一般可以采取以下措施来改变选择性：

a. 改变流动相的组成及pH值； b. 改变柱温； c. 改变固定相。

③改变容量因子。这常常是提高分离度的最容易方法，可以通过调节流动相的组成来实现。

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